前言
病毒性肝炎(viral hepatitis)是由多種不同肝炎病毒引起的一組以肝臟損害為主的傳染病，可分為甲、乙、丙、丁、戊、庚六種類(lèi)型，各型之間無(wú)交叉免疫，可同時(shí)或先后感染，混合感染或重疊感染，使癥狀加重。甲型病毒性肝炎和戊型病毒性肝炎以糞－口傳播為主，常見(jiàn)發(fā)熱、黃疽，呈急性經(jīng)過(guò)，罕見(jiàn)遷延成慢性；乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎，多經(jīng)輸血或血制品以及密切接觸傳播，易遷延發(fā)展成慢性甚至肝硬化，已證實(shí)乙型和丙型肝炎病毒感染與肝癌有一定關(guān)系；丁型病毒性肝炎需依賴(lài)于乙型肝炎病毒而存在并復(fù)制，常與乙型肝炎病毒呈混合感染或在乙型肝炎病毒陽(yáng)性的慢性乙肝病程中重疊感染。目前建立的病毒性肝炎動(dòng)物模型主要有甲型肝炎病毒模型、乙型肝炎病毒模型、丙型肝炎 病毒模型和戊型肝炎病毒模型。
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是一單股正鏈RNA病毒，可引起急性和慢性病毒性丙型肝炎(hepatitis C)，可發(fā)展成肝纖維化、肝硬化甚至肝細(xì)胞癌。HCV呈全球性流行，根據(jù)世界衛(wèi)生組織的統(tǒng)計(jì)，HCV在人群中的感染率約為3%，全球約有1.7億人感染HCV，每年新發(fā)丙型肝炎病例約3.5萬(wàn)例。我國(guó)進(jìn)行的全國(guó)HCV血清流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)一般人群抗HCV陽(yáng)性率為3.2%，約有4000萬(wàn)人感染HCV。相比HBV，在我國(guó)HCV感染受到的重視程度還不夠。相關(guān)研究也和國(guó)外有較大差距，本部分就目前HCV研究用動(dòng)物模型作一介紹，供相關(guān)領(lǐng)域研究者參考。
部分造模方法
使用動(dòng)物：黑猩猩、樹(shù)鼩、大鼠
【造模機(jī)制】：
丙型肝炎病毒傳播途徑與艾滋病毒和乙肝病毒相似，主要經(jīng)輸血、母嬰和性傳播，將HCV患者血清或細(xì)胞培養(yǎng)的HCVcc靜脈注射到動(dòng)物體內(nèi)，誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生類(lèi)似于人類(lèi)自然感染丙型肝炎病毒后的疾病進(jìn)程。
【造模方法】：
黑猩猩(pan troglodytes)：用HCV患者血制品通過(guò)靜脈注射黑猩猩，或?qū)Ⅲw外轉(zhuǎn)錄制備的HCV RNA注射到黑猩猩肝臟中，可使黑猩猩感染HCV病毒。黑猩猩感染HCV后出現(xiàn)轉(zhuǎn)氨酶升高，肝活檢呈現(xiàn)急性壞死性炎癥改變。
樹(shù)鼩：用HCV患者血清或細(xì)胞培養(yǎng)得到的HCV病毒(HCVcc)通過(guò)靜脈或肝臟多點(diǎn)注射方式注射到樹(shù)鼩體內(nèi)，可使樹(shù)鼩感染HCV并出現(xiàn)間歇性病毒血癥。
大鼠：將人原代肝細(xì)胞或人肝癌細(xì)胞Huh7腹腔注射到孕齡在15~17天的胎鼠中，并在出生24小時(shí)內(nèi)向其移植人原代肝細(xì)胞或Huh7，使胎鼠的免疫系統(tǒng)在發(fā)育過(guò)程獲得對(duì)這些細(xì)胞的免疫耐受，隨后向大鼠接種從患者血清分離到的HCV，可使其獲得對(duì)HCV的感染性。
【模型特點(diǎn)】：
黑猩猩是HCV的自然宿主，在感染HCV后可以自然清除病毒，慢性攜帶者不會(huì)發(fā)展為肝硬化或肝纖維化，并對(duì)干擾素治療無(wú)效。黑猩猩感染HCV后只有個(gè)別被報(bào)道最后發(fā)展為肝細(xì)胞肝癌。
樹(shù)鼩感染HCV能產(chǎn)生瞬時(shí)病毒血癥，HCV抗體、ALT、HCV RNA陽(yáng)性。陽(yáng)性樹(shù)鼩的血漿同樣可以感染新樹(shù)鼩，樹(shù)鼩感染HCV后肝里織病理改變過(guò)程與人類(lèi)丙型肝炎的進(jìn)展一致，即慢性肝炎→肝脂肪變→肝硬化→肝癌。圖7-1/文末彩圖7-1示樹(shù)鼩感染HCV后肝臟病理改變情況。
大鼠在HCV感染4周后在血清中可檢測(cè)到7.0×103拷貝數(shù)／ml HCV RNA, 12周后HCV RNA達(dá)到峰值20×103拷貝數(shù)／ml，之后開(kāi)始下降。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶在4周開(kāi)始升高，第13周到達(dá)高峰，之后開(kāi)始下降。顯微鏡下可見(jiàn)肝門(mén)和中央?yún)^(qū)域單核細(xì)胞浸潤(rùn)。
圖7-1 樹(shù)鼩感染HCV后肝臟病理改變情況
注：A．對(duì)照組：正常肝組織(H&E×400);B-F．樹(shù)韻感染HCV后肝臟病理學(xué)改變；B．脂肪變性、膽汁淤積(H&E×200);C．肝細(xì)胞空泡樣變性(H&E×400); D．膽管損傷，伴匯管區(qū)慢性炎細(xì)胞浸潤(rùn)(H&E×200);E．免疫組化HCV抗原胞質(zhì)陽(yáng)性(×400);F．免疫組化HCV抗原胞質(zhì)片灶狀陽(yáng)性(×200)
【模型評(píng)估和應(yīng)用】：
黑猩猩是目前除人類(lèi)外唯一可以被HCV感染的靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物，黑猩猩感染HCV，其臨床過(guò)程與人類(lèi)HCV感染相似，并能夠形成慢性感染，慢性攜帶者不會(huì)發(fā)展為肝硬化或肝纖維化?？梢杂糜谘芯縃CV的急性感染，研究在急性期內(nèi)HCV的病毒學(xué)變化和宿主的免疫反應(yīng)；研究HCV自然感染過(guò)程中病理學(xué)、免疫反應(yīng)等方面的變化和HCV疫苗的研發(fā)。但黑猩猩不適合研究慢性感染和與HCV相關(guān)的肝細(xì)胞肝癌。目前，NIH 已經(jīng)禁止在生物醫(yī)學(xué)研究中使用黑猩猩。
樹(shù)鼩是一種有前景的HCV動(dòng)物模型，遺傳進(jìn)化上比小鼠、家兔等更接近靈長(zhǎng)類(lèi)。感染HCV后，能產(chǎn)生瞬時(shí)病毒血癥，HCV抗體、ALT、HCV RNA陽(yáng)性?？捎糜谘芯縃CV入侵和復(fù)制機(jī)制。
大鼠模型獲得的動(dòng)物是免疫功能正常的大鼠， 可用于研究HCV的入侵、復(fù)制、免疫介導(dǎo)的肝損傷和作為藥物篩查的工具，但由于體內(nèi)移植的人肝癌細(xì)胞數(shù)量有限，HCV感染后病毒載量低，也限制了其應(yīng)用。
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